微生物检测 Ebio Reader 3700飞行时间质谱系统在微生物检测中的应用
2024-07-23 12:47:39 华体网官网
是一种软电离生物质谱,具有操作简单便捷、结果高准确性、检测速度快和低成本等优点,目前已成为可靠的微生物快速鉴定技术,在微生物领域有着十分广泛的应用。
TM3700M飞行时间质谱系统是东西分析仪器有限公司开发的一款以MALDI-TOF为平台的多功能生物信息阅仪。它是一款多用途多功能的生物检验测试平台,既能够适用于临床医学检测,也能够适用于非临床领域诸如食品安全,非法添加,疾控,工业微生物等检测。
MALDI-TOF MS正是这样一种基于蛋白质检测的微生物快速鉴定技术。其原理是利用质谱技术将蛋白质按分子量大小排列形成独特的指纹图谱,通过测定某一细菌的蛋白质组成,并将特征峰与数据库中的参考谱图对比,即可对细菌做准确的鉴定。
MALDI-TOF MS的主要的因素。EbioReaderTM3700M拥有强大数据库,包含有4000余种微生物,包括多种临床致病菌,可以在一定程度上完成菌种的实时鉴定,无需上网检索鉴定;其搭载的神经网络AI算法,可对基因型相近的难辨菌(大肠杆菌和志贺氏菌)做准确区分。同时具有自建库功能,可按照每个用户的真实的情况建立自己的特有菌种库。
TM3700M利用具有深度学习分析功能的神经网络人工智能软件,能轻松实现对大肠埃希氏菌和志贺菌的准确区分鉴定。
Eppendorf管中加入300µl纯净水,挑取适量(5~10mg)菌体,混匀,再加入900 µl无水乙醇,混匀后以12000r/min离心2min,弃去上清液,待管中残留液体彻底干燥后,加入50µl 70%甲酸,混匀,再加入50µl乙腈,混匀,同样以12000r/min离心2min,吸取上清液,与等体积的基质溶液(CHCA)混合,然后涂布于96孔样品板上,自然晾干后进样。用校准品对仪器进行质量轴校正,随后利用Ebio ReaderTM 3700M质谱仪进行样品检测。
1.7时,结果高度可信。本实验中检测的样品质谱结果得分2.3,表示高属水平鉴定,可能的种水平鉴定。
95%,被慢慢的变多的制药企业和药监管理系统所重视。《中国药典》2020版也新增洋葱伯克霍尔德菌检查指标。
1.菌种阳性对照:在生物安全柜内,将洋葱伯克霍尔德氏菌冻干粉溶于胰酪大豆胨液体培养基中,在32℃的电热恒温培养箱中培养,备用。
2.地氯雷他定口服溶液:取三个批次地氯雷他定口服溶液溶于胰酪大豆胨液体培养基中,置32℃电热恒温培养箱中培养;
3.地氯雷他定口服溶液+菌种培养:取三个批次地氯雷他定口服溶液和已制备的菌悬液溶于胰酪大豆胨液体培养基中,置32℃电热恒温培养箱中培养;
5000r/min离心5 min收集沉淀物,加入300µl纯净水,混匀,再加入900 µl无水乙醇,混匀后以12000r/min离心2min,弃去上清液,待管中残留液体彻底干燥后,加入50µl 70%甲酸,混匀,再加入50µl乙腈,混匀,以12000r/min离心2min,吸取上清液。
2000 Da~15000 Da;激光点击数:每图谱200;激光频率:20 Hz;离子源加速电压:20 kV。每次实验前用校准品对仪器进行质量轴校正。
Ebio ReaderTM3700M飞行时间质谱系统,东西分析可提供食源性致病菌高通量、高自动化解决方案,高效地为食源性疾病诊断提供有价值的检测结果。
是一种非常有前景的微生物鉴别判定的方法,它具有很明显的准确性和高效性,尤其在临床使用中,常规微生物鉴定需要经过较长时间的培养,而且过程较为繁琐,费用较为昂贵。但是MALDI-TOF MS短的可以几秒出结果,而且成本较低,可以更多的惠及患者。
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